01
主混液分装使用自己的中央实验台
美国疾病控制与预防中心关于分子遗传检测的建议指出,不在封闭系统内完成的扩增需要单向流程,包括试剂配制、样品制备、扩增和产物检测各自的区域。文中的封闭系统,是指纯化、扩增和检测过程中使用者不必打开装有扩增产物的管子。因此分区先问检测本身。若检测是按制造商说明使用的封闭系统,就不要为了满足只针对敞开流程的要求,去虚构三间摆满台子的房间。
流程若是敞开的,加州大学戴维斯分校实时 PCR 核心实验室把试剂间限定为配制和存放试剂、分装储备液,以及把主混液加入管子。专用移液器、带滤芯的吸头、实验服和手套留在该房间。样品制备间和扩增间的任何物品,包括阳性对照,都不得进入。这间房里的中央实验台只服务于这些分装步骤,以及同样不离开房间的试剂架。它不是运行量大时可以推到下一间的备用桌子。
02
核酸加在另一张中央实验台上
同一核心实验室把提取、纯化和加入样品与对照放在第二间房。已经装有主混液的管子在这里接收核酸。实验服和手套是新的,移液器是另一套。该说明还要求房间内使用生物安全柜,样品和阴性对照用一只,阳性对照用另一只,避免两项工作共用一个腔体。若规程允许某一步使用开放台面,这间房的中央实验台只承担规程点名的开放步骤。它不能代替安全柜。
加州大学旧金山分校的一份教学规程提到,有的实验室在扩增前房间的台面上加入 DNA,有的使用层流罩,真正重要的是单向移动。这句话只说明应该询问使用者:他们的规程已经指定了哪一种台面。它不是要求每一间分子实验室都配置中央实验台。规程若写的是安全柜,这一步骤的中央实验台数量就是零。规程若写的是开放台面,这张中央实验台就留在本房间,不再兼做试剂分装。
03
扩增产物留在产生它的房间
美国公共卫生实验室协会把扩增及扩增后房间称为污染房间。热循环仪、扩增后分析、凝胶和装有扩增子的管子留在这里,在这里穿过的个人防护装备也不穿进清洁房间。疾病控制与预防中心还要求无模板对照伴随扩增,以便发现残留污染,并指出用扩增方法制备对照品本身就可能污染实验室。这些是操作规则。家具上的后果更简单:扩增间里的中央实验台是第三件物品,不是下午被搬过去的试剂台。
若扩增间放不下中央实验台,不要改用扩增前的台子在运行后接收反应板。应记录更小的固定台面,或写明扩增后工作还没有家具行。凝胶和打开的管子不为了拍照或下一次配制而回到试剂间。协会要求扩增产物不离开扩增后房间。跨在门口的台子会让这条要求无法执行。
04
把推车、试剂架和移液器固定在一个房间
戴维斯的说明写明,设备不在试剂间、样品间和扩增间之间搬动,实验记录本也不跨房间。推车在这条规则下就是设备。本分区表里的移动家具有房间名和任务:试剂储备只送到试剂间的中央实验台,提取后的核酸最远只到样品间,扩增废物只到达该房间通向建筑废物出口的路线,不反向穿过清洁房间。停在走廊里的共用推车,就是流程所禁止的桥。
试剂架同样固定。装主混液分装的架子,即使尺寸相同,以后也不装扩增板。按房间写架数。使用者若需要一只备用,备用也有自己的房间。衣钩和手套盒在这里不是无关紧要的细节。核心实验室的指导把实验服视为污染控制:与同一区域的实验服一起清洗,并在离开扩增间之前脱掉。图上可以画出衣钩。不能画成一只衣钩服务三间房。
05
写明中央实验台不是什么
疾病控制与预防中心对生物安全二级的指导要求,可能产生感染性材料喷溅或气溶胶的操作使用生物安全柜或其他围护。中央实验台只是规程允许的开放台面,不是围护装置。把它放对位置,也不会改变风险评估,或批准在开放台面上操作感染性物质。这些决定留在机构的审查。
可以报价的表格应写出三间房,或写明建筑的房间更少;列出允许设置中央实验台的每一间里的台面长度;并列出禁止跨房间的安全柜和移动件。分子实验室或 PCR 套间这类笼统说法完不成这件事。若以后封闭系统仪器取代了敞开流程,中央实验台的行应当修改,不能因为家具已经画过就继续留着。
进入报价前,把中央实验台布置的房间尺寸、使用侧和公用工程接口与上文的流程记录放在一起。最终配置仍以确认后的报价和图纸为准。
